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      1. NRPB02L 重组蛋白G琼脂糖凝胶FF

        发布日期:2018-10-27 阅读次数:3344

        品  名:重组蛋白G 琼脂糖凝胶FF

        英文名:Recombinant Protein G NUPharose Fast Flow, rProtein G NUPharose FF

        目录号:NRPB02L、NRPB02S(预装柱)

        规  格:20 ml,100 ml,1 L,1 ml预装柱,5 ml预装柱,特殊规格订制

        运  输:2 ~ 25℃,常压、避光

        贮  存:20%乙醇,2 ~ 8℃

        保质期:3年


        相关介绍:

        链球菌G蛋白(Streptococcus Protein G 简称SPG)是G、C型链球菌细胞壁中的一种蛋白质,能特异性地同免疫球蛋白IgG分子的Fc段结合而不影响其Fab段与抗原分子结合的能力,其亲和填料可以用于从血清、腹水、组织培养物等上清中结合吸附并纯化免疫球蛋白(抗体)。


        技术指标:

        基质

        4%高度交联琼脂糖凝胶

        配基

        重组蛋白G

        配基密度

        ≥6 mg/ml

        填料粒径

        60 ~ 180 μm

        最大流速

        800 cm/h

        推荐流速

        20 ~ 100 cm/h

        工作(清洗)pH

        2 ~ 9(2 ~ 10)

        耐反压

        0.3 MPa

        载量

        ≥40 mg/ml IgG


        抗体与蛋白A、蛋白G的结合力:

        种类

        Species

        亚型

        Antibody Class

        蛋白A

        Protein A

        蛋白G

        Protein G

        Human

        IgG1

        IgG2

        IgG3

        IgG4

        IgM

        IgD

        IgA

        Fab

        +++

        +++

        +

        +++

        +

        -

        +

        +

        +++

        +++

        +++

        +++

        -

        -

        -

        +

        小鼠

        Mouse

        IgG1

        IgG2a

        IgG2b

        IgG3

        IgM

        +

        +++

        +++

        +++

        -

        ++

        +++

        +++

        +++

        -

        大鼠

        Rat

        IgG1

        IgG2a

        IgG2b

        IgG2c

        +

        -

        -

        +++

        ++

        +++

        +

        +++

        Cow

        IgG1

        IgG2

        +

        +++

        +++

        +++

        山羊

        Goat

        IgG1

        IgG2

        +

        +++

        +++

        +++

        Horse

        IgG(ab)

        IgG(c)

        IgG(T)

        +

        +

        -

        -

        -

        +++

        Rabbit

        IgG

        +++

        +++

        Pig

        IgG

        +++

        +

        Dog

        IgG

        +++

        +

        Chicken

        IgY

        -

        -


        注:-表示不结合;+表示微弱结合;++表示中等结合;+++表示很强结合。


        应用举例:

        结合缓冲液:20 mM磷酸盐缓冲液(PB),pH 7.4

        洗脱缓冲液:0.1 M甘氨酸-盐酸缓冲液,pH 2.7

        中和缓冲液:1 M Tris-HCl,pH 9.0

        1)1 ml重组蛋白G琼脂糖凝胶预填柱,用5 ~ 10个柱床体积的蒸馏水洗去保存液;

        2)用结合缓冲液平衡 5 ~ 10个柱床体积;

        3)将5 ml兔多抗血清用结合缓冲液稀释至50 ml,0.45 μm滤膜过滤上样;

        4)用结合缓冲液平衡 5 ~ 10个柱床体积至基线;

        5)用洗脱缓冲液洗脱抗体,收集洗脱峰,并用中和缓冲液调节其pH至中性;

        6)每次使用后再用3 ~ 5个柱床体积的洗脱缓冲液再生清洗;

        7)SDS-PAGE(图1)电泳分析洗脱下来的兔多抗纯度在95%以上。


        图片29.jpg图片30.jpg

        图 1


        注意事项:

        1)预填柱使用简易方便,在没有仪器设备的条件下也可以完成纯化任务。

        2)样品洗脱后一般pH很低,应立即用碱性中和缓冲液(如1 M Tris-HCl,pH 9.0) 将收集到的抗体溶液中和到中性,或在收集容器中事先装5% ~ 20%、pH 7 ~ 9的缓冲液(如1 M Tris-HCl或1 M 磷酸缓冲液),以利于维持抗体的生物活性,避免抗体失活。

        3)使用时保证柱子和缓冲液的温度一致,避免柱床内产生气泡,影响纯化效果,如果已经产生气泡,可以自行重装柱子。

        4)通常目标样品洗脱后应继续用0.1 M甘氨酸-盐酸缓冲液(pH 2.0 ~ 2.7)洗3 ~ 5个柱体积,然后用平衡缓冲液清洗5个柱体积以上,作简易再生。

        5)使用数次后应进行在位清洗,建议用0.1% Triton X-100 37℃洗1 ~ 3个柱体积(10 ~ 30 min),立即用平衡缓冲液清洗5个柱体积以上;或70%乙醇洗5个柱体积以上(可保持4 ~ 6 h),再用平衡缓冲液清洗5柱体积以上。在位清洗能去除强疏水性蛋白质和脂类,恢复柱子的载量和流速。

        6)

        推荐流速

        预装柱体积ml

        1 ml

        5 ml

        10 ml

        流速(ml /min )

        0.2

        1

        2

        导购指南


        中文名

        英文简称

        货号

        规格

        产品描述

        重力预装柱

        重组蛋白G琼脂糖凝胶FF重力预装柱

        ProG NUPharose FF pre-packed columnn

        NRPB02S-Z11

        1*1mL

        1支*1ml

        NRPB02S-Z41

        4*1mL

        4支*1ml

        NRPB02S-Z15

        1*5mL

        1*5mL

        NRPB02S-Z25

        2*5mL

        2支*5mL

        AKTA中压预装柱

        重组蛋白G琼脂糖凝胶FF中压预装柱

        ProG NUPharose FF pre-packed columnn

        NRPB02S-Y11

        1*1mL

        1支*1ml

        NRPB02S-Y41

        4*1mL

        4支*1ml

        NRPB02S-Y15

        1*5mL

        1*5mL

        NRPB02S-Y25

        2*5mL

        2支*5mL

        填料

        重组蛋白G琼脂糖凝胶FF

        ProG NUPharose FF

        NRPB02L-10

        10mL

        1瓶*10ml

        NRPB02L-20

        20mL

        1瓶*20ml

        NRPB02L-100

        100mL

        1瓶*100ml

        NRPB02L-500

        500ml

        1瓶*500ml

        注:sungame生物填料体积为实际琼脂糖凝胶体积


        1. sungame地图 地图